植物硝酸還原酶(NR)ELISA試劑盒實驗原理以及注意事項
植物硝酸還原酶(NR)ELISA試劑盒實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被植物硝酸還原酶(NR)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物硝酸還原酶(NR)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
植物硝酸還原酶(NR)ELISA試劑盒注意事項
1.嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2.洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4.底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。
5.避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6.在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8.任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9.不能使用過期產品。
10.如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。