一、昆蟲保幼激素(JH)ELISA試劑盒詳細介紹:
中文名稱:昆蟲保幼激素(JH)ELISA試劑盒
規格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:昆蟲ELISA試劑盒
檢測波長:450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用范圍:僅供科研,不得用于臨床診斷
保存及有效期:2-8℃,六個月
檢測樣本種類:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本的含量或者表達。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
臻科生物供應的種屬有:昆蟲、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、昆蟲、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等。
二、實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中昆蟲保幼激素(JH)水平。用純化的昆蟲保幼激素(JH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入保幼激素(JH),再與HRP 標記的保幼激素(JH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的保幼激素(JH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中昆蟲保幼激素(JH)濃度。
三、試劑盒組成:
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(240 pmol/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
四、操作步驟:
1、準備試劑,樣品和標準品
2、加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘
3、洗板5次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘
4、洗板5次,加入顯色A、B,37℃顯色10分鐘
5、加入終止液
6、15分鐘之內讀OD值后計算
五、試劑盒計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
六、注意事項:
1、試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2、濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3、各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4、請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6、底物請避光保存。
7、嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9、本試劑不同批號組分不得混用。
七、特別提醒:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。