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elisa試劑盒規范使用,效果會更好

 更新時間:2019-09-24 點擊量:1003
  elisa試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。
 
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  1、樣本的收集及血清分離中要留意盡量防止細菌污染,一則細菌的成長,其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發生分化作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應酶作符號的測定辦法發生非特異性攪擾。
 
  2、血清標本如是以無菌操作分離,則能夠在2~8℃下保存一周,豬elisa試劑盒如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長期保存,應在-70℃以下。
 
  3、要留意防止呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的豬elisa試劑盒測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育進程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
 
  4、標本在保存中如呈現細菌污染所造成的的混濁或絮狀物時,應離心沉積后取上清檢測。Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的試驗確診辦法。因為其試劑安穩、易保存,操作簡便,成果判斷較客觀等要素,已廣泛應用在免疫學查驗的各領域中。
 
  5、冰凍保存的血清標本須留意防止因停電等形成的重復凍融。豬elisa試劑盒標本的重復凍融所發生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發生損壞作用,然后引起假陰性成果。此外,凍融標本的混勻亦應留意,不要進行劇烈振動,重復倒置混勻即可。
 
  在進行elisa試劑盒實驗時,各項條件的選擇也是非常重要的:
 
  1、固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚苯乙烯、纖維素等。其形式可以是凹孔平板、珠粒等。目前常用的是四十孔的聚苯乙烯凹孔板。不論使用哪一種載體,在使用前進行篩選:在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應的均一性如何,以此來判斷其吸附性能是否良好。
 
  2、包被抗體的選擇:將抗體吸附在固相載體表面的時候,一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度,進行包被后,當其它試驗條件大致一樣的情況下,觀察陽性標本的OD值。選擇蛋白量少,OD值大的濃度。